島津LC-10AT液相色譜儀使用流程與規范
更新時間:2012-09-03 點擊次數:4646
島津LC-10AT液相色譜儀,是一款高性價比高*的HPLC,下文為該款機型的使用流程的規范:1.目的
規范島津LC-10AT型液相色譜儀的使用。
2.范圍
適用于島津LC-10AT型液相色譜儀的使用。
3.職責
質檢員對本規程的實施負責。
4.規程
4.1系統組成:本系統由2個LC-10ATvp溶劑輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、Rheodyne7725i手動進樣閥、SPD-10Avp紫外-可見檢測器、N2000色譜數據工作站和電腦等組成,另外還包括打印機、不間斷電源等輔助設備。
4.2準備
4.2.1準備所需的流動相,用合適的0.45μm濾膜過濾,超聲脫氣20min。
4.2.2根據待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱(注意方向)和定量環。
4.2.3配制樣品和標準溶液(也可在平衡系統時配制),用合適的0.45μm濾膜過濾。
4.2.4檢查儀器各部件的電源線、數據線和輸液管道是否連接正常。
4.3開機:接通電源,依次開啟不間斷電源、B泵、A泵、檢測器,待泵和檢測器自檢結束后,打開打印機、電腦顯示器、主機,zui后打開色譜工作站。
4.4參數設定
4.4.1波長設定:在檢測器顯示初始屏幕時,按[func]鍵,用數字鍵輸入所需波長值,按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出到初始屏幕。
4.4.2流速設定:在A泵顯示初始屏幕時,按[func]鍵,用數字鍵輸入所需的流速(柱在線時流速一般不超過1ml/min),按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出。
4.4.3流動相比例設定:在A泵顯示初始屏幕時,按[conc]鍵,用數字鍵輸入流動相B的濃度百分數,按[Enter]鍵確認。按[CE]鍵退出。
4.4.4梯度設定
4.4.4.1在A泵顯示初始屏幕時,按[edit]鍵,[Enter]鍵;
4.4.4.2用數字鍵輸入時間,按[Enter]鍵,重復按[func]鍵選擇所需功能(FLOW設定流速,BCNC設定流動相B的濃度),按[Enter]鍵,用數字鍵輸入設定值,按[Enter]鍵;
4.4.4.3重復上一步設定其它時間步驟;
4.4.4.4用數字鍵輸入停止時間,重復按[func]鍵直至屏幕顯示STOP,按[Enter]鍵。按[CE]鍵退出。
4.5更換流動相并排氣泡
4.5.1將A/B管路的吸濾器放入裝有準備好的流動相的儲液瓶中;
4.5.2逆時針轉動A/B泵的排液閥180°,打開排液閥;
4.5.3按A/B泵的[purge]鍵,pump指示燈亮,泵大約以9.9ml/min的流速沖洗,3min(可設定)后自動停止;
4.5.4將排液閥順時針旋轉到底,關閉排液閥。
4.5.5如管路中仍有氣泡,則重復以上操作直至氣泡排盡。
4.5.6如按以上方法不能排盡氣泡,從柱入口處拆下連接管,放入廢液瓶中,設流速為5ml/min,按[pump]鍵,沖洗3min后再按[pump]鍵停泵,重新接上柱并將流速重設為規定值。
4.6平衡系統
4.6.1按《N2000色譜數據工作站操作規程》打開“在線色譜工作站”軟件,輸入實驗信息并設定各項方法參數后,按下“數據收集”頁的[查看基線]按鈕。
4.6.2等度洗脫方式
4.6.2.1按A泵的[pump]鍵,A、B泵將同時啟動,pump指示燈亮。用檢驗方法規定的流動相沖洗系統,一般zui少需6倍柱體積的流動相。
4.6.2.2檢查各管路連接處是否漏液,如漏液應予以排除。
4.6.2.3觀察泵控制屏幕上的壓力值,壓力波動應不超過1MPa。如超過則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡,按4.5.6操作。
4.6.2.4觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min,噪聲為<0.001mV時,可認為系統已達到平衡狀態,可以進樣。
4.6.3梯度洗脫方式
4.6.3.1以檢驗方法規定的梯度初始條件,按4.6.2項下方法平衡系統。
4.6.3.2在進樣前運行1~2次空白梯度。方法:按A泵的[run]鍵,prog.run指示燈亮,梯度程序運行;程序停止時,prog.run指示燈滅。
4.7進樣
4.7.1進樣前按檢測器[zero]鍵調零,按軟件中[零點校正]按鈕校正基線零點,再按一下[查看基線]按鈕使其彈起。
4.7.2用試樣溶液清洗注射器,并排除氣泡后抽取適量。